Comentários do Congresso da SBPz - 19 a 21 de setembro de 2011, Foz do Iguaçu
Post de Leonardo Arruda
Sobre a palestra de Myler PJ
A disponibilização do
genoma de várias espécies de Leishmania revolucionou a habilidade para investigar
a biologia e fisiopatologia destes parasitas. Entretanto, nem todos os mecanismos
para regulação da expressão gênica foram elucidados.
Buscando contribuir
neste campo, os autores analisaram todo transcriptoma de diferentes espécies de
leishmania (L. major, donovani, amazonensis, braziliensis
e tarentolae), utilizando uma nova tecnologia
denominada seqüenciamento de RNA de alto rendimento (RNA-seq), com a finalidade
de analisar os níveis dos RNAm e suas sequências nas diferentes fases do ciclo celular.
Foram desenvolvidas
diferentes formas para a construção de bibliotecas para RNA-seq. Entre elas, aquela
com resultados mais surpreendentes foi o mapeamento da região final 5’ dos
mRNAs. Esta abordagem foi tão sensível, que foi possível a utilização do RNA
total oriundo de extração de macrófagos infectados ou diretamente do RNA extraído
da lesão de animal. Além disso, foram obtidas informações sobre o local de
adição da SL (Sequencia Líder – lembrar que no trans-splicing ocorre a adição
da SL na porção 5’ e a poli-adenilação na porção 3’ em cada gene) bem como
abundância do mRNA para cada espécie / fase do ciclo.
Os resultados obtidos
foram impressionantes, pois foi observado uma mudança no sítio de adição da SL
durante a diferenciação celular. Por precisamente definir as terminações 5’ e
3’ dos mRNAs, estes resultados permitiram redefinir anotações estruturais no
genoma destas espécies. Sendo assim, muitos genes anteriormente ditos como
ortólogos tiveram sua função designada.
Os resultados deste
estudo permitirão o melhor entendimento sobre a biologia da leishmania, como
início e término da transcrição. Os autores ainda estão comparando os sítios de
adição da SL bem como a abundância do mRNA entre as espécies.
